1. 使用前先检查，确保酒精灯灯体无破损，灯芯平整且无烧焦，酒精量在灯容积的1/4至2/3之间。
2. 点燃酒精灯必须使用燃着的火柴，绝对禁止用另一个燃着的酒精灯去引燃，以防酒精洒出引起火灾。
3. 加热时应使用酒精灯的外焰，因为其温度最高。被加热的仪器必须放在支撑物上，或用夹持工具固定，严禁用手直接持拿。
4. 熄灭酒精灯时，必须用灯帽盖灭，严禁用嘴吹。若为玻璃灯帽，盖灭后需再重盖一次，以放走酒精蒸汽并平衡气压。
5. 绝对禁止向燃着的酒精灯内添加酒精，必须先熄灭火焰并冷却后再添加。若酒精洒在桌上燃烧，应立即用湿抹布或沙土扑盖，不能用水。