1. 检查与准备：使用前检查灯体是否完好，灯芯是否平整或烧焦。若灯芯顶端不平或烧焦，需用剪刀修整。确认灯内酒精量应在容积的1/4到2/3之间。
2. 添加酒精：若酒精量不足，需先熄灭酒精灯并待其冷却后，再用漏斗添加酒精。绝对禁止向燃着的酒精灯内添加酒精，以防酒精洒出引起火灾。
3. 点燃酒精灯：取下灯帽直立放在右侧，使用燃着的火柴或打火机从侧面点燃灯芯。绝对禁止用另一个燃着的酒精灯去引燃，以免酒精溢出造成危险。
4. 加热操作：应使用酒精灯的外焰进行加热，因为外焰温度最高。加热时，被加热的仪器必须放在铁架台或三脚架等支撑物上，或用试管夹等夹持，严禁用手直接持拿。
5. 熄灭酒精灯：加热完毕，必须用灯帽盖灭火焰，严禁用嘴吹灭，以防将火焰压入灯内引起爆炸。若为玻璃灯帽，盖灭后需重盖一次，以放走酒精蒸汽，平衡气压。